論文參考 - 以動物模式探討膳食補鐵狀況對於大鼠肌肉及肝臟tRNA表現量與硫醇鹼基修飾化之情形及其專一性影響

來源：以動物模式探討膳食補鐵狀況對於大鼠肌肉及肝臟tRNA表現量與硫醇鹼基修飾化之情形及其專一性影響

摘要

轉錄作用中，tRNA負責攜帶特定的胺基酸至mRNA上與其密碼子相互配對，進行蛋白質胜鏈的合成。在tRNA的作用機制上，研究指出tRNA上wobble反密碼子之鹼基修飾與mRNA密碼子辨識功能有關，其中第34號wobble位置擁有最多種類之鹼基修飾。鹼基修飾之一是wobble位置的硫醇鹼基修飾，其硫原子的來源與利用與硫鐵蛋白有關，後者之含量則與鐵營養狀況有關。本研究將深入了解鐵營養對tRNA分子形式與功能的影響，首先進行營養depletion-repletion實驗，以tRNALys與tRNAGlu為目標，檢視鐵營養對肌肉組織tRNA硫醇鹼基修飾的劑量效應。針對不同含鐵濃度去偵測大鼠肌肉及肝臟tRNA不同劑量對於tRNALys與tRNAGlu探針的表現，接續欲探討不同濃度硫酸亞鐵之補充（6、12、18、24、35 ppm）對於膳食缺鐵大鼠tRNA表現量及硫醇修飾化程度之關係。實驗步驟分為t RNA定性與定量，以及動物實驗兩大項目。實驗結果顯示，北方點墨分析法及APM-北方點墨分析法分別為偵測肌肉及肝臟組織tRNA表現量及tRNA硫醇鹼基修飾作用之重要工具，不論是在肌肉及肝臟組織， tRNAGlu的探針訊號遠高於tRNALys。另外，本研究證實膳食鐵劑之補充會增加肌肉細胞質tRNALys及tRNAGlu表現量及其硫醇鹼基修飾化作用，但對於肝臟組織，膳食鐵劑量補充對於提高肝臟細胞質tRNAGlu表現量及其硫醇鹼基修飾較為明顯，另外，本實驗也確認了膳食鐵劑對於肌肉含硫醇鹼基修飾tRNA分子之表現為專一性反應。