Katerina's Blog: 2014

2014年12月22日星期一

食品工廠建築及設備設廠標準 (民國 103 年 03 月 05 日修正)

2014年11月24日星期一

2014年11月16日星期日

【心得。雜記】204/11/10 營養生化作業

題目：請問何謂苯酮尿症( Phenylketon uria；PKU )?其缺乏症狀?

自己找答案：2014/11/10 訂正：

2014年10月27日星期一

【衛生福利部。法規】2014/10/27_食品添加物品相關法規

法規名稱：製造、加工、調配、改裝、輸入或輸出『食品添加物使用範圍及限量暨規格標準』收載之單方食品添加物（香料除外），應辦理查驗登記

2014年10月26日星期日

【心得。雜記】2014/10/26 營養生化作業

題目：請說明人體中脂蛋白的分類、特徵、生理作用。

自己找答案：2014/10/26 訂正：2014/10/27

2014年10月20日星期一

2014年10月9日星期四

我因個人因素我延遲了將近一星期才開始我的實習。
實習這一週以來，老師臨時安排了校稿的任務，一開始接這任務時，我實在腦袋空白。
「校稿？離我好遙遠的事兒呢~」，但畢竟什麼樣的新鮮事都該嘗試。

在校稿的過程中，其實也是一種學習，老實說我也是在找：用最輕鬆的閱讀方式，抓出最多的錯誤!!((誤
→→→當然這些錯誤，都是錯別字或格式上的問題。

整個校稿工作時間為兩天。過程多少會感到壓力7%、眼花23%、無趣30%、有趣40。
但整體心情：愉快。

在校稿任務開始結束前後，老師談了許多。

在現有的時間與資源內，如何獲得最多?
兩天讀完半本書感受如何?
如果兩天能讀完9個章節，那學校的考試其實也是最簡單的吧!?
要將考試視為下限，往上無限發展。

至少就以上我目前回想這幾點是讓我最印象深刻，也值得思考。

論文參考 - 癌存活者飲食頻率問卷之發展及生活品質探討

來源：癌存活者飲食頻率問卷之發展及生活品質探討

摘要

隨醫療發展的進步與癌症篩檢的普及，癌症存活率逐年上升，癌存活者的人口數日益增多，為無法忽視的一族群，除營養補充品外，癌存活者的食物攝取狀況仍未有足夠之資料。本研究目的係以台灣飲食習慣為基礎，蒐集居家癌存活者之飲食資料，建立一份適合評估癌存活者食物攝取狀況之飲食頻率問卷，並檢測其信效度。研究以17 位之居家癌存活者為對象，由合格營養師進行6次團體衛教及9次個人營養諮詢，為期近7個月。照護期間癌存活者以小組支持與互助形式參與精力湯製作及活動討論，並以飲食記錄本紀錄個人每日飲食內容與接受兩次飲食頻率問卷施測，由研究人員將飲食資料蒐集後於「營養九九資訊網—專業營養網」建檔，所得數據使用統計軟體分析。結果顯示，與飲食記錄相比，飲食頻率問卷所獲之資料有高估情況，尤是熱量、維生素A效力、維生素B1、維生素C、磷、鉀、鎂和鋅這些項目達到顯著性差異 (p < 0.05)；而豆魚肉蛋類、水果類、蔬菜類與乳類與飲食記錄均有良好的相關性 (r = 0.57 - 0.81, p < 0.05)，將食物類別轉換為營養素後，以熱量、蛋白質、膽固醇、維生素B1、磷、鉀、鐵、鎂達到顯著相關性 (r = 0.49 - 0.78, p < 0.05)。
另外，欲瞭解癌存活者生活品質狀況及提供營養照護對其生活品質之影響，經授權同意後採用歐洲癌症治療與研究組織發展之癌症病人生活品質核心問卷 (EORTC QLQ-C30 version 3.0) 台灣中文版及自編式自我效能問卷，於營養照護前後進行問卷調查。實驗組為接受營養照護者，計 39 人；對照組為一般癌存活者，計 48 人。結果發現，實驗組在營養照護後整體生活品質平均分數為 82 ± 17 分，顯著比對照組之 66 ± 22 分高 ( p < 0.001)，且生理功能（平均分數為 90 ± 9 分）、角色功能（平均分數為 96 ± 10 分）、情緒功能（平均分數為 87 ± 12 分）及社會功能（平均分數為 90 ± 13 分）得分皆顯著比對照組高，在症狀評估方面，實驗組之噁心嘔吐（平均分數為 1 ± 6 分）、疼痛（平均分數為 16 ± 17 分）與財務困難（平均分數為 5 ± 12 分）得分顯著比對照組低，顯示實驗組於此三方面的狀況比對照組佳。在自我效能評估方面，實驗組在營養照護後自評估計食物份量大小的能力增加，且相較於對照組更能夠應用食物類別及份量概念，規劃與搭配自己每日的飲食。本研究結果可應用於目前的癌存照護上，營養師提供癌存活者營養照護服務有助於改善其生活品質及增進飲食營養技能，且可以此飲食頻率問卷作為營養諮商的輔助工具。本研究獲得「財團法人癌症關壞基金會」及「中華民國癌友新生命協會」之協助。

論文參考 - 鐵營養對於大鼠肌肉和肝臟tRNA硫醇鹼基修飾之影響

來源：鐵營養對於大鼠肌肉和肝臟tRNA硫醇鹼基修飾之影響

摘要

Transfer RNA (tRNA) 含豐富的鹼基修飾，目前已知達 100 多種，常見的修飾位置在 tRNA 第 34 號位置 (wobble) 和第 37 號位置，真核生物 tRNAGlu(UUC)、tRNAGln(UUG)、tRNALys(UUU) 和 tRNAArg(UCU) 上的 34 號 Uridine 鹼基 (U34) 常被修飾為 5-methyl-2- thiouridine (xm5s2U, x=為任何取代型式) 的衍生物，主要功能是使 tRNA 反密碼子與 mRNA 密碼子正確辨識與結合，缺乏修飾的核苷酸會導致轉譯效能降低且增加轉譯錯誤，進而影響基因表現。前人以鐵螯合劑 DFO 模擬大鼠肌肉細胞 (L6) 內缺鐵情況，缺鐵會減少細胞質 tRNA 硫鹼基修飾作用，但目前對大鼠肌肉和肝臟 tRNA 總鹼基修飾情形仍未完全了解。因此本研究利用高效能液相層析法 (HPLC) 分析大鼠肝臟和肌肉 tRNA 總鹼基修飾和 mcm5s2U 硫鹼基修飾情形，並進一步以 Northern blot 方法探討鐵營養影響大鼠細胞質含硫修飾 tRNAGlu(UUC)、tRNALys(UUU) 和 tRNAArg(UCU) 的修飾程度與表現量，以動物實驗進行分析，利用大鼠血紅素 (Hb) 再生法，大鼠經耗鐵期三周後，補充不同濃度硫酸亞鐵兩週，結束後根據 Hb 濃度高低將動物分成五組 4-5 g/dL、6-7 g/dL、8-9 g/dL、10-11 g/dL、≥ 12 g/dL。從 HPLC 分析結果得知，肌肉以 Hb 濃度低下 (4-5 g/dL) 組別之總 tRNA 硫醇鹼基 mcm5s2U 含量較 Hb 濃度高者 (≥ 12 g/dL) 減少將近 60%，此修飾隨著 Hb 濃度降低有減少之趨勢；其他類型的修飾鹼基則沒有顯著影響；對肝臟組織皆沒有顯著影響。在肌肉細胞質中 tRNAGlu(UUC)、tRNALys(UUU) 和 tRNAArg(UCU) 表現量，以 Hb 濃度最低 (4-5 g/dL) 比最高 (≥ 12 g/dL) 分別顯著減少 65%、45%、52%。在肌肉細胞質中 tRNALys、tRNAArg 和tRNAGlu 硫醇修飾量，以 Hb 濃度最低 (4-5 g/dL) 比最高組 (≥ 12 g/dL) 分別顯著減少 20%、24%、26%；對肝臟組織皆沒有顯著影響。本研究初步證實動物缺鐵性貧血時，會導致大鼠肌肉組織細胞質 tRNA 表現量及硫醇修飾化程度降低，以及總 tRNA 之硫鹼基 mcm5s2U 含量，且隨著鐵營養狀況良好時 tRNA 硫醇鹼基的修飾會隨之上升，而在其他常見的修飾鹼基則沒有受此影響而改變，表示鐵營養對肌肉組織 tRNA 硫醇鹼基 mcm5s2U 和細胞質中 tRNA 硫醇修飾作用具有組織專一性影響。

論文參考 - 孕婦孕程之生化營養狀況追蹤

來源：孕婦孕程之生化營養狀況追蹤

摘要

母體營養狀態足以影響胎兒成長後的健康與疾病發展，因此孕期營養對於下一代的健康相當重要。本研究目的為以血液及尿液生化定量分析法來評估懷孕各階段營養狀況，除了對孕婦較關鍵的微量營養素葉酸和鐵，另分析在臺灣可能較有缺乏風險的維生素B2和維生素D，以及為WHO所關注的碘營養問題，並依補充劑使用情形分組觀察補充劑的使用對於懷孕婦女的營養是否有所助益。本研究屬縱貫式追蹤法，以2009年衛生署委託之計畫樣本為依據，選定臺灣桃園敏盛醫院104名健康孕婦為研究對象，87%的第一次受訪孕婦為懷孕16週以下，由懷孕初期定期追蹤至生產前，配合健保提供孕婦四次抽血檢驗的時間，於孕婦回診時填寫問卷並進行血液及尿液採集。結果發現受試孕婦存有碘、維生素B2、葉酸、鐵和維生素D的不足情形；孕婦攝取含對應營養素之補充劑，對於提升該微量營養素狀態的效益高於無攝取者，尤其在懷孕後期更為明顯。但在營養狀態上，對懷孕初期相當關鍵卻易被忽略的碘有約50%以上的不足；同為初期重要營養素葉酸，未補充的孕婦有83%不足；於懷孕第二期開始扮演重要角色的維生素B2，在懷孕24–27週時未補充的孕婦中卻有最高不足率（57%）；懷孕最後階段時，未補充的鐵缺乏或耗盡率為87%；而未補充維生素D者在初期和後期分別有86%和80%的不足。以上結果顯示孕婦存有各營養素缺乏的風險，而補充劑效益顯著且能提升某些營養素如維生素B2、葉酸、鐵的營養狀態。懷孕或育齡婦女之營養狀態是亟需被關切的，未來需要更多後續相關調查研究，以期能針對此一族群加強飲食營養選擇建議或適當的補充劑介入。

論文參考 - 以動物模式探討膳食補鐵狀況對於大鼠肌肉及肝臟tRNA表現量與硫醇鹼基修飾化之情形及其專一性影響

來源：以動物模式探討膳食補鐵狀況對於大鼠肌肉及肝臟tRNA表現量與硫醇鹼基修飾化之情形及其專一性影響

摘要

轉錄作用中，tRNA負責攜帶特定的胺基酸至mRNA上與其密碼子相互配對，進行蛋白質胜鏈的合成。在tRNA的作用機制上，研究指出tRNA上wobble反密碼子之鹼基修飾與mRNA密碼子辨識功能有關，其中第34號wobble位置擁有最多種類之鹼基修飾。鹼基修飾之一是wobble位置的硫醇鹼基修飾，其硫原子的來源與利用與硫鐵蛋白有關，後者之含量則與鐵營養狀況有關。本研究將深入了解鐵營養對tRNA分子形式與功能的影響，首先進行營養depletion-repletion實驗，以tRNALys與tRNAGlu為目標，檢視鐵營養對肌肉組織tRNA硫醇鹼基修飾的劑量效應。針對不同含鐵濃度去偵測大鼠肌肉及肝臟tRNA不同劑量對於tRNALys與tRNAGlu探針的表現，接續欲探討不同濃度硫酸亞鐵之補充（6、12、18、24、35 ppm）對於膳食缺鐵大鼠tRNA表現量及硫醇修飾化程度之關係。實驗步驟分為t RNA定性與定量，以及動物實驗兩大項目。實驗結果顯示，北方點墨分析法及APM-北方點墨分析法分別為偵測肌肉及肝臟組織tRNA表現量及tRNA硫醇鹼基修飾作用之重要工具，不論是在肌肉及肝臟組織， tRNAGlu的探針訊號遠高於tRNALys。另外，本研究證實膳食鐵劑之補充會增加肌肉細胞質tRNALys及tRNAGlu表現量及其硫醇鹼基修飾化作用，但對於肝臟組織，膳食鐵劑量補充對於提高肝臟細胞質tRNAGlu表現量及其硫醇鹼基修飾較為明顯，另外，本實驗也確認了膳食鐵劑對於肌肉含硫醇鹼基修飾tRNA分子之表現為專一性反應。

論文參考 - 米食對C57BL/6JNarl及ICR小鼠肝臟抗氧化系統與大腸組織之影響

來源：米食對C57BL/6JNarl及ICR小鼠肝臟抗氧化系統與大腸組織之影響

摘要

長久以來，稻米一直是亞洲許多國家與台灣的主要糧食來源，亦為重要的經濟作物。稻米含有許多抗氧化與抗發炎的物質，主要存在糙米的糠層與胚芽中。流行病學研究指出，攝食較多含有抗氧化成分的食物與降低多種人類疾病的發病率與死亡率有關。所以，若以全穀類米食取代普遍較常食用的精白米，作為膳食中的主食來源，應具有促進健康之潛力。本研究探討攝食米食對於小鼠肝臟與大腸抗氧化能力之影響，實驗動物採用兩種不同品系的小鼠：近交系C57BL/6JNarl雄性小鼠（國家實驗動物中心）與遠交系ICR雄性小鼠（樂斯科生技公司）。依實驗飼料組成分成五組：AIN-93G組（93G）、高蛋白質AIN-93G組（modified AIN-93G, M93G）、Chow diet（Chow）組、高蛋白質白米組（polished rice, PR）與高蛋白質米糠加糙米組（brown rice enriched with rice bran, RB）。實驗期間給予各組小鼠配方飼料並定期記錄攝食量與體重，飼養四週後犧牲。分析項目：肝臟與近端大腸抗氧化酵素、大腸長度與遠端大腸組織免疫染色。抗氧化酵素包括榖胱甘肽過氧化酶、榖胱甘肽還原酶、榖胱甘肽硫基轉移酶、超氧歧化酶與過氧化氫酶；組織免疫染色以Ki-67作為遠端大腸黏膜上皮細胞增生指標。結果顯示，在相同飼養條件下，不同鼠種的反應不盡相同：C57BL/6JNarl雄性小鼠各組平均體重差異大，而肝臟抗氧化酵素比活性組間差異較小；ICR雄性小鼠則是各組平均體重差異小，肝臟抗氧化酵素比活性組間差異較明顯。遠端大腸黏膜上皮細胞增生能力則在二鼠種間有相似之趨勢：93G組與M93G組有較低之增生能力。白米與米糠加糙米飼料使小鼠有較重體重，且攝食chow diet與米糠加糙米飼料，有助提升C57BL/6JNarl雄性小鼠肝臟抗氧化能力與ICR雄性小鼠肝臟及近端大腸抗氧化能力。因此，米食與非精製之飲食，具有提升組織抗氧化能力與疾病預防之潛力。

論文參考 - 鐵營養對於大鼠肌肉和肝臟tRNA硫醇鹼基修飾之影響

2014年9月22日星期一

食品良好衛生規範(89.09.07)

食品良好衛生規範(89.09.07)

保健食品專業人才能力鑑定 ─ 保健食品初級工程師能力鑑定

來源：保健食品初級工程師能力鑑定

103年，報名辦法及准考證注意事項

103年，能力鑑定報考資格/日期/科目/內容

2014年9月10日星期三

隨手記（待續）

開學週~
與以往不同的是，隱隱約約有些什麼不同？（（其實自己也不是那麼清楚
繼上次"我的收穫是「0」 "其實，我也不是真的認為自己收穫是0，而是在問問自己：究竟收穫了什麼？
暑期2個月，在蕭老師的實驗室裡我做了些什麼？
文書類（新的事物）：
2014年最新版，營養學概論，我協助了第3版校稿。
（2天內完成，有點眼花是真的，哈哈）
協助統計問卷，從紙本變成excel。
（總計似乎也才花了不到24小時完成，實際上分散用了將進1星期完成，這讓我認識excel 了。）
目前，正在進行的生命期營養Index,Glossary編輯。（從無到有，從PDF→Excel)
實作（感覺很新鮮）：
協助APP資料庫的建立，為了這資料庫，我想台大的店員應該都對我印象深刻，大量採買他們的商品，只為了商品上的營養標示、條碼以及幫商品拍照....。我負責拍照部份，拍照也不是件容易的事情，也透過這次的協助，我更認識了我的相機 = ="
實驗（全新不同）：
尿碘實驗，前後共操作了3次。尿碘實驗，不容易阿.....。
（未完，待續。）

2014年8月13日星期三

截至今天，我的收穫當然不是" 0 "！！

目前狀態：

老師出國去了~

姊姊們上課去了~

剩一位學姊陪伴(但大部分都忙實驗)~

嚴格來說~實驗室剩2隻實習小貓顧家~

趁這空檔邊享用我的早餐邊思考著：截至目前我學到了什麼??

首先想到的是，我思考的「邏輯性」與「完整性」嚴重缺乏!!!

這對我來說可是個重大發現呢~!!((別笑...T T

以往做事狀態：上面要求80，我就做到自以為的80，事實上可能60都不值....

當然蕭老師不可能直接劈我，直接舉了許多例子，用超級白話文跟我討論，每次進她辦公室沒有1個半鐘頭出不來....((實際上心情是：興奮!!!

但，感想是：說歸說，老師嘴上說的是最低標準，剩下的就是無上限的發展。

這形成了，無形的自我要求。

二來想到的是，別老是想回答問題，動腦先。

每每在跟老師討論時，老師提的問題總讓我很啞口

何謂「營養均衡」?是「飲食均衡」還是「營養素均衡」?

如果速食店標營養標示會怎麼樣?標了又會怎麼樣?

速食真的都這麼糟糕嗎?

光這些問題，截至目前沒有標準答案。((有標準答案嗎?? 哈哈

然後想到的是，一天可以看完半本教科書(相當於9個章節)

那學校老師一個章節可以教1星期~2星期是怎樣??

是老師不會教嗎???還是老師在拖時數???老師在偷懶??

有些老師為何越教越少?? ((人數、內容

學東西一定要跟著學校的節奏嗎??((太慢了...

那如果自己可以讀好，剩下的時間可以怎麼安排?

最後突然想到的是，截至目前，實際的實驗操作：0

唯一的一次與實驗有關是「看」學姊操作尿碘實驗~

那麼，我的收穫是??? 收穫真的是0嗎!!

2014年7月23日星期三

麥胖報告心得 (2014.07.24)

有關於速食店的相關報導，我想大家應該都看過不少。
這次看了「麥胖報告」之後，我對於吃的感受，我想不僅僅只對速食店更有感覺而已。
影片中，主角用比較極端的方式：30天3餐都吃速食。
從開始前的身體健檢，實驗中的健檢與營養師建議，到實驗過程中所面臨到的問題──肝受傷了。
整體感受：驚嚇。

2014年7月20日星期日

第二週：營養標示

實驗數據如下：

實驗結果──「熱量kcal」那部分的數據，是依照產品包裝標示填寫，我們並沒有實際的去分析測量其產品熱量。

常說：「有圖有真相」，但老實說，一開始我還真一點感覺也沒有......((遭毆
但是為了列表格倒是查了「衛生福利部公告：訂定「包裝食品營養標示應遵行事項」，自104年7月1日生效」的法規，目的：了解應遵行的項目。

又為了更確定「每日建議鈉攝取量」查了「營養共筆」，原來每日建議鈉攝取量為2400mg相當於6g的鈉，且超過就是「太鹹」。回頭看看這次實驗的品項，隨便一項就200、400、500mg，如果今天我比較餓，吃了2個飯糰，跟好友吃個外食，豈不爆表!?

但其實爆不爆表先不談，我最先有感覺到的是：現在的人，真的都吃太鹹了。
因天然食物中都含有鈉，在烹調各種食物時一下抹鹽、調味，上桌後又調味瓶狂加，真的太鹹。我也是讀了「你超過每天鈉攝取量2400毫克嗎？」後，對於自己目前的飲食方向更有信心了。

透過這次的「食物拆解」與「認識營養標示」實驗，我有感覺了，至少對鈉有較深刻的感受，一方面是自己目前進行「零飲食」：0果糖、0調味料，但事實上是否真的都達到零，我不知道。吃起來清淡，但未必都沒有調味過，但至少看得見得，自己掌握得到的，盡力執行。
當然一開始我母親也開玩笑的說，吃得這麼辛苦幹麻? 但自從外婆的腎出了問題，媽媽親自烹調營養師衛教的飲食，也親自吃過之後，媽媽告訴我：我嚇到了，好難吃。
我笑了，不是嘲笑，是高興的笑，我也竭盡所能將我所知道的知識告訴媽媽。
媽媽說：「我會盡量清淡飲食，我可不想老了跟你阿婆一樣，吃沒味道的飯菜，又動不動就要看醫生，你累我更累。」
真的好多事情都是在身邊人發生了、自己去看過、自己去了解了，那種體會與感受是深刻的。
阿原閒聊過：笨。如果今天都不告訴他、教他，這叫做笨嗎? 又如果告訴他、教他後學會了，那還會是笨嗎?
這句話深植我心，這讓我聯想到，許多民眾的營養都是在知與不知的模糊地帶，又加上媒體的誇大不實，養成現在的人都沒有媒體識讀能力，然而民眾真的是笨嗎?

2014年7月14日星期一

衛生福利部公告：訂定「包裝食品營養標示應遵行事項」，自104年7月1日生效

來源：衛生福利部公告：訂定「包裝食品營養標示應遵行事項」，自104年7月1日生效

得免營養標示之包裝食品規定(民國 103 年 06 月 10 日修正)

來源：得免營養標示之包裝食品規定民國 103 年 06 月 10 日修正)

2014年6月13日星期五

筆記：B12

來源：台灣地區食品營養成分資料庫

B12

(16)維生素B12

維生素B12可謂目前發現最複雜的維生素，與鈷成複合物存在，故又稱鈷氰維生素(Cyanocobalamin)。由於其構造極為複雜，必須以微生物檢定法來定量。目前所用菌株為Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis ATCC 7830 (CCRC 11051)。(AOAC 1995k, Sec 952.20)

筆記：維生素B6

來源：台灣地區食品營養成分資料庫

論文參考 - 含白色蔬果之高脂飲食對ICR小鼠大腸黏膜基因表現的影響

來源：含白色蔬果之高脂飲食對ICR小鼠大腸黏膜基因表現的影響

摘要

大腸直腸癌盛行於已開發國家，近年來國內大腸直腸癌發生率逐年攀升，已成為國人發生人數最多的癌症。研究指出大腸直腸癌的發生與飲食型態有密切關係，目前主要的保健飲食建議為降低脂質及增加蔬果攝取量。蔬菜與水果富含多種膳食纖維、維生素、礦物質及植化素，大部分研究認為高蔬果飲食可降低罹患大腸直腸癌風險。考量國人近年飲食西化，脂質攝取量明顯增加，因此本研究以預防之觀點，透過微陣列分析於高脂飲食下個別探討攝食國人常食用之白色蔬果對小鼠大腸黏膜基因表現之影響，藉由基因表現差異評估對腸道保健之可能效益。實驗動物選用非近親交配品系雄性ICR小鼠，依照飼料組成分為六組：高脂組（HF）、高脂荔枝組（HFL）、高脂龍眼組（HFO）、高脂芭樂組（HFG）、高脂冬瓜組（HFW）及Chow diet組（Chow），高脂飼料提供脂質熱量百分比為30%，高脂蔬果組則於高脂飼料中添加10%蔬果乾粉。各組餵食四週後犧牲，採集大腸黏膜總RNA進行微陣列分析與執行Q-PCR加以驗證；採集血液與肝臟分析三酸甘油酯、膽固醇與維生素C濃度。高脂冬瓜組之體重增加與肝臟三酸甘油酯濃度低於高脂組與高脂水果組，然而高脂組與高脂蔬果組於攝食量無顯著差異。微陣列分析結果顯示，與低脂Chow組比較，高脂組小鼠大腸黏膜中於參與免疫反應、反應氧化壓力、細胞增生、細胞凋亡及脂質代謝相關等基因之表現量增加；與高脂組相比，高脂蔬果組小鼠大腸黏膜中於參與免疫反應、反應氧化壓力、細胞增生、細胞凋亡及脂質代謝相關等基因之表現量減少。Q-PCR驗證可見，高脂組大腸組織中發炎指標cyclooxygenase-2（COX-2）、細胞增生指標Ki-67基因表現量高於Chow組與高脂蔬果組。攝食高脂飲食會增加小鼠大腸環境中之免疫反應、細胞增生、細胞凋亡、脂質代謝與反應氧化壓力相關基因表現，顯示高脂飲食對大腸健康具較負面影響；於高脂飲食下攝取白色蔬果則與高脂飲食基因表現呈現相反結果，顯示攝取白色蔬果可改變高脂影響的趨勢，其中以冬瓜最具潛力。

2014年6月9日星期一

2014.04.30 MRS培養基

配置MRS培養基

MRS(尚未加入Agar)

粉末配方：MRS, Agar

目標體積：2800 mL ( 700mL*4瓶)

配置 Gram's Stain 試劑 → Safranin（for gram staining）

Safranin（for gram staining）

Safranin O （2.5% sol’n in 95% ethyl alcohol）----------------10.0 mL
Distilled water ----------------------------------------------------------100.0mL

來源：Microbiological Applications （P329）
ISBN：0-697-13764-3

本次目標 1100 mL

材料

Safranin O ----------------------- 2.5 g
95% 的酒精 -----------------------100mL
Distilled water -------------------1000 mL
1000 mL 廣口血清瓶 ------------*1
攪拌石 ------------------------------*1
電磁加熱攪拌器--------------------*1
電子秤 ------------------------------*1
藥勺 ---------------------------------*1
100mL 小燒杯---------------------*1
1000 mL 定量筒 ------------------*1
500 mL 定量筒 --------------------*1
滴管架 ------------------------------*1
玻璃漏斗 ---------------------------*1

方法

先秤重 2.5 g 的 Safranin O ，再將100 mL 的酒精倒入廣口血清瓶，接著將秤好的 Safranin 倒入，此時得到Safranin O 的濃度為 2.5% 。>> Safranin O，95% 的酒精，500 mL 定量筒，藥勺，電子秤，100mL 小燒杯，漏斗，1000 mL 廣口血清瓶。
將配製好的2.5% Safranin ，加入1000 mL 的Distilled water ，同時可以將攪拌石至入，放在電磁加熱攪拌器一邊加水一邊攪拌。 >> Distilled water，攪拌石，電磁加熱攪拌器，1000 mL 定量筒。
最後，將小瓶放在滴管架，用玻璃漏斗輔助分裝，每瓶60~80 mL 。>> 玻璃漏斗，滴管架。

2014年6月7日星期六

配置 Gram's Stain 試劑 → Gram’s Iodine

Gram's Iodine（Lugol’s）

potassium iodide 2.0 gm in 300 mL of distilled water and then add 1.0 g iodine crystals.

來源：Microbiological Applications （P330）
ISBN：0-697-13764-3

本次目標 900 mL

材料：

potassium iodide 2.0 g*3 --------- 6.0 g
iodine crystals 1.0 g *3 ----------- 3.0g
distilled water 300 mL*3 --------- 900 mL
1000 mL 量桶 ------------------------*1
磁性攪拌棒 -----------------------------*1
900mL 廣口血清瓶 -------------------*1
藥勺 -------------------------------------*1
電子秤 ----------------------------------*1
電磁加熱攪拌器 -----------------------*1
100 mL 燒杯 --------------------------*1
玻璃漏斗 -------------------------------*1

※備註：過程中的所有容器與器材皆需用 distilled water 沖洗過。
方法：

先取純水 900 mL 。>> 1000 mL 量桶。
先將燒杯放在電子秤歸零，秤重 potassium iodide 6.0 g，接著再按一次歸零，秤重 iodine crystals 3.0 g 。>> 電子秤、藥勺、100 mL 燒杯。
將廣口血清瓶置放在電磁加熱攪拌器上，將剛秤重好的藥品，用玻璃漏斗輔助倒入廣口血清瓶，同時也可將磁性攪拌棒置入。>> 900 mL 廣口血清瓶、玻璃漏斗、電磁加熱攪拌器、磁性攪拌棒。
接著，將 900 mL 純水倒入廣口血清瓶，同時可以用此純水，倒一些來沖洗燒杯、沖洗玻璃漏斗至廣口血清瓶內。
最後，分裝在小瓶子內，每個小瓶子約 60 ~ 80 mL 如有剩餘，保存以備用。

2014年5月26日星期一

2014.05.20 黃麴毒素快篩片檢測（新增中）

2014.05.26 磺胺藥物快篩片檢測（新增中）

2014.05.26 配製 0.01M 的 HCL ( 圖片待新增 )

材料：

濃鹽酸：37%、2.5 L
100 mL 定量瓶 ------------*3
安全吸球 --------------------*1
250mL 廣口血清瓶 -------*3
玻璃pipette -----------------*1
25mL pipette -------------- *1
25mL tip
燒杯（裝廢棄 tips、玻璃pipette）

操作：

取濃鹽酸 8.4 mL 至定量瓶，加純水至 100mL ，蓋上蓋子搖晃2次（倒置 - 翻正），倒入廣口血清瓶保存。此濃度為 1M 。>>濃鹽酸、定量瓶、安全吸球、玻璃pipette、廣口血清瓶。
第一次稀釋，使用25mL pipette 取 1M 的鹽酸 10mL 至定量瓶，加水至100mL ，蓋上蓋子搖晃2次（倒置 - 翻正），倒入廣口血清瓶保存。此濃度為 0.1M 。>> 1M鹽酸、定量瓶、25mL pipette、tips、廣口血清瓶。
第二次稀釋，使用使用25mL pipette 取 0.1M 的鹽酸 10mL 至定量瓶，加水至100mL ，蓋上蓋子搖晃2次（倒置 - 翻正），倒入廣口血清瓶保存。此濃度為 0.01M 。>> 0.1M鹽酸、定量瓶、25mL pipette、tips、廣口血清瓶。

-------------------------------- 以下筆記、圖片（待新增）------------------------------------

2014年5月22日星期四

2014.05.02 水質檢測器材 -- 開箱文

預先準備器材，水質檢測實驗預計在 2014.05.05 操作。

---------------------------------------- 以下，開箱囉！ ----------------------------------------

黃麴毒素標準品配製（新增中）

2014年5月12日星期一

2014/05/12 水質檢測結果（修編中）

聲明：

此次實驗為學生練習，操作程序不完全按照法規之規定。
過程中使用之濾水器材，未經滅菌，所以實驗之結果恐經汙染，其實驗結果不具任何效力純屬學生練習。
以下水源名稱皆不公佈，採馬賽克處理，皆以A,B,C...代稱之。

2014年5月7日星期三

2014/05/05 水質採樣、過濾、檢測（修編中）

採樣

器材：

廣口血清瓶*4 >> 200mL （事先滅菌過）
滅菌酒精
打火機

方法：

先將目標水龍頭的水打開，使其出水20秒。
出水完畢後，先用酒精噴過或是火烤過滅菌。
滅菌完畢後，用血清瓶裝水。>> 200mL的容量，裝到滿；若是500mL的容量就裝300mL。

------------------------------------------ 以下圖片 ------------------------------------------

將出水口先用火烤過滅菌

滅菌完後，取水樣

過濾

器材：

無菌濾膜*4

方法：

先將鑷子沾95%的酒精用火燒過滅菌後，取無菌濾膜置入濾水裝置。
將水樣倒入裝置100mL，開水龍頭開始抽氣、過濾。
過濾完畢，用鑷子(沾95%酒精用火燒滅菌過)將濾膜取下，將濾膜置入培養基(慢放，減少氣泡產生)，在培養皿底部標示日期與名稱。
以上動作重覆四次(因共4個水樣)。
最後將完成的培養皿裝入夾鏈袋，通氣，置入培養箱35℃，培養48小時。(培養時間待確認)

------------------------------------------ 以下圖片 ------------------------------------------

2014年4月30日星期三

2014/03/21 懷孕第二期一日飲食+額外所需的500Kcal

食材：

第一組發配食材時候沒有注意到蛋要另外分開放，因為蛋殼的表面有沙門氏桿菌的問題，這樣可能會造成沙門氏桿菌污染問題。
生熟食要分開。玉米粒屬於熟食，應分開另外裝!!如圖中這樣擺在餅皮上不恰當。

2013.12.09 練習定量與稀釋- Pipette 及安全吸球

練習操作安全吸球及Pipette

學生練習用安全吸球
(另外有新的安全吸球，圖片待新增。)

練習定量連續稀釋

心得：

在一般情況下pipette裡的最後一滴是不用擠出來的。

在一般練習情況下，使用同一支pipette從低濃度 → 高濃度取樣是可以接受的。

pipette插入安全吸球的深度多少 ? 才不會導致安全吸球內的玻璃球脫落而損毀。

要使試液從pipette至容器時，pipette尖端要貼於容器璧。

練習操作1ml、10ml的pipette。

2013.12.16 乳酸菌飲料 >> 測定生菌數 - pour plates(崩潰修正中）

乳酸菌飲料稀釋

依序在6支試管上標明-1 ~ -6代表稀釋度。
使用10mL的pipette取9mL的NaCl至試管內。

使用1mL的pipette取1mL的乳酸菌飲料至試管。
每稀釋一個濃度，就更換一支新的pipette。

培養皿

認識 agar 。
如何一個人獨立操作讓手法更加順暢。
這次實驗使用到MRS agar，適用於乳酸菌培養。

備註：這次的實驗沒有練習燒瓶口以及不在無菌操作台進行。

2013.12.23 測定生菌數- spread plates ( 新增中 )

食品微生物之檢驗方法－生菌數之檢驗

行政院衛生署公告：訂定「食品微生物之檢驗方法－生菌數之檢驗」，自即日生效(101.11.19)

食品微生物之檢驗方法－生菌數之檢驗

101年11月19日署授食字第1011902832號公告

1. 適用範圍：本方法適用於食品中生菌數之檢驗。

2. 檢驗方法：檢體經系列稀釋後，以平板計數培養基培養及計數之方法。

2.1. 工作環境：工作平台須寬敞、潔淨、光線良好，操作平台光度為100呎燭光以上，密閉室內換氣良好，儘可能沒有灰塵及流動空氣。每15分鐘落菌數不得超過 15 C FU／培養皿。

2.2. 器具及材料

2.2.1. 乾熱滅菌器。

2.2.2. 高壓滅菌釜。

2.2.3. 冰箱：能維持5 ± 3℃ 者。

2.2.4. 培養箱：能維持內部溫度溫差 ± 1.0℃ 以內者。

2.2.5. 水浴：能維持水溫溫差 ± 1.0℃ 以內者。

2.2.6. 攪拌均質器（Blender）或鐵胃（Stomacher）：能適用於無菌操作者。

2.2.7. 天平：可稱量到 2000 g ，靈敏度為 0.1 g ；可稱量到 120 g ，靈敏度為5 mg。

2.2.8. 旋渦混合器（Vortex mixer）。

2.2.9. 酸鹼度測定儀（pH meter）。

2.2.10. 菌落計數器：適用於菌落之計算者。

2.2.11. 吸管輔助器（Pipette aid）。

2.2.12. 吸管（Pipette）：已滅菌。 1 m L吸管應有 0.01 m L之刻度； 5 m L及 10 m L吸管應有 0.1 m L刻度。

2.2.13. 培養皿：已滅菌，內徑約 90 mm ，深度約 15 mm ，底皿之內外面應平坦，無氣泡、刮痕或其他缺點。

2.2.14. 稀釋用容器：無菌袋或有1000 mL、500 mL、 99 m L及 90 m L標記附蓋（栓）之可滅菌廣口瓶。

2.2.15. 藥勺、剪刀、小刀、壓舌板及鑷子：可滅菌或可拋棄式者。

2.2.16. pH試紙：範圍6-8。

2.2.17. 試藥：氯化鈉、磷酸二氫鉀（KH₂PO₄）、氫氧化鈉、葡萄糖（glucose）及油酸聚醇山梨酯（polysorbate 80, Tween 80）均採用試藥級；蛋白腖（peptone）、胰化蛋白腖（tryptone）、酵母抽出物（yeast extract）及洋菜（agar）均採用微生物級。

2.2.18. 1N氫氧化鈉溶液之配製：

　　稱取氫氧化鈉 4 g ，加入無菌水溶解使成100 mL。

2.2.19. 稀釋液之配製：

2.2.19.1. 生理食鹽水：

　　取氯化鈉8.5 g，溶於蒸餾水 1000 m L中，分裝於稀釋用容器中，經 121℃ 滅菌15分鐘。

2.2.19.2. 磷酸鹽緩衝液（Butterfield's phosphate-buffered dilution water）：

　　取磷酸二氫鉀 34 g ，溶於蒸餾水500 mL，以1N氫氧化鈉溶液調整pH值為7.2，再加蒸餾水使成1000 mL，以121℃ 滅菌15分鐘，貯存於冰箱中，作為原液。使用時，取原液1.25 mL，加入蒸餾水使成1000 mL，分裝於稀釋用容器中，以 121℃ 滅菌15分鐘。

2.2.19.3. 0.1%蛋白腖稀釋液（0.1% peptone diluent）：

　　取蛋白腖 1 g ，溶於蒸餾水使成1000 mL，分裝於稀釋用容器中，經 121℃ 滅菌15分鐘，最終pH值為7.0 ± 0.1。

2.2.20. 平板計數培養基（Plate count agar, PCA），亦稱標準方法培養基（Standard method agar）

胰化蛋白腖（tryptone）........................................................................................ 5 g

酵母抽出物（yeast extract）.............................................................................. 2.5 g

葡萄糖（glucose）................................................................................................. 1 g

洋菜（agar）........................................................................................................ 15 g

蒸餾水.............................................................................................................. 1000 mL

　　加熱溶解後，分裝於適當之容器中，經 121℃ 滅菌15分鐘，最後pH值為7.0 ± 0.2。

2.3. 檢液之調製

2.3.1. 固態檢體：將檢體切碎混合均勻後，取 50 g ，加入稀釋液450 mL，混合均勻，作為10倍稀釋檢液。

2.3.2. 粉狀、粒狀或其他易於粉碎之檢體：以已滅菌之藥勺或其他用具將檢體粉碎後，混合均勻，取 50 g ，以下步驟同 2.3.1 .節之操作。

2.3.3. 液態檢體：將檢體振搖均勻混合，取 50 m L，作為原液，以下步驟同 2.3.1 .節之操作。

2.3.4. 冷凍檢體：須解凍者，如冷凍魚、禽畜肉、蔬果、水餃等，應在冷藏之溫度下解凍（如2～ 5℃ ，18小時內即可解凍完全）；亦可使用較高溫度快速解凍（置於 45℃ 以下之水浴中，可在15分鐘內解凍之檢體適用之）。解凍時應經常搖動檢體，以加速解凍。俟檢體解凍後，再予以切碎並混合均勻。不須解凍者，如食用冰塊、冰棒等冰類製品，應速先行使成適當小塊；再依 2.3.1 .節，製成10倍稀釋檢液。如檢驗工作無法立即進行，應將檢體貯存於 -20℃ 。

2.3.5. 凝態及濃稠液態檢體：如布丁、煉乳、海苔醬等，經攪拌均勻後，取 50 g ，以下步驟同 2.3.1 .節之操作。

2.3.6. 系列稀釋檢液：使用已滅菌之吸管，吸取上述之10倍稀釋檢液 10 m L加至稀釋液 90 m L中，依序作成100倍、1000倍、10000倍等一系列稀釋檢液，其稀釋方法如下圖所示。

註：1. 除肉製品使用0.1%蛋白腖稀釋液外，其他檢體以磷酸鹽緩衝液作為稀釋液，其次為生理食鹽水。

　　2. 檢體總量不足50 g（mL）時，應依檢體量，添加適量之稀釋液，作成10倍稀釋檢液。

　　3. 處理含油脂量多，不易勻散及易起泡沫之檢體時，應加入適量已滅菌之乳化劑（如Tween 80，使其於檢液中濃度為1%），並充分振搖，使之乳化。

2.4. 生菌之培養

2.4.1. 將稀釋檢液及（或）原液充分振搖，混合均勻。

2.4.2. 各吸取各稀釋檢液及（或）原液 1 m L分別置入培養皿中，各檢液至少做二重複。

2.4.3. 另吸取稀釋液 1 m L置入培養皿中，作為空白對照組（二重複）。

2.4.4. 2.4.2.節及2.4.3.節之各培養皿中倒入冷卻至45 ± 1℃ 之平板計數培養基（PCA）12～15 mL，搖動混合，自檢液之調製至此步驟應於15分鐘內完成。

2.4.5. 將 2.4.4 .節之培養基平板靜置，待培養基凝固後，倒置於 35℃ 培養48 ± 2小時。

2.5. 生菌之計算

2.5.1. 經培養後，選取25～250個菌落之兩個平板來計數，其生菌數之表示方式為CFU/g或CFU/mL。

2.5.2. 若各稀釋倍數中僅有一種稀釋倍數平板之菌落數為25～250個，則應以該稀釋倍數之兩個平板之菌落數平均值乘其稀釋倍數，即得其生菌數（附表：樣品編號1）；但若有兩種稀釋倍數之平板之菌落數在25～250個之間時，則應依下列公式計算之，但生菌數結果表示時應將該數字第三位數字四捨六入（當第三位數字為五時，遇第二位數字為奇數時進位，偶數時捨去），使其有效數為兩位。（附表：樣品編號2）。

　　　　生菌數（CFU/g或CFU/mL）＝

　　Aa、Ab：A稀釋倍數各平板內之菌落數。

　　Ba、Bb：B稀釋倍數各平板內之菌落數。

　　A、B：稀釋倍數。

2.5.3. 各稀釋倍數之菌落數均小於25個時，則以最低稀釋倍數之兩個平板菌落數平均值乘其稀釋倍數。並註明其為估計值（附表：樣品編號3）。

2.5.4. 平板中菌落數大於250個時，則先計數平板中菌落分佈其代表性之一部份，再計算生菌數，而以估計值表示（附表：樣品編號4）。

2.5.5. 擴散菌落，擴散菌落可分為3種形式：

　　(1) 鏈狀菌落，不能明顯分離，似乎由一堆細菌分裂生長而成。

　　(2) 細菌生長介於培養基及培養皿底部間之一層水氣中。

　　(3) 細菌生長於培養基邊緣或表面上之一層水氣上。

2.5.5.1. 平板內產生擴散菌落時應以下述之方法計數。（附表：樣品編號5）擴散菌落所覆蓋面積（包括被擴散菌落造成之抑制生長範圍）超過整個平板面積之1/2時或者被擴散菌落造成之抑制生長範圍超過1/4時，應不予計數，而記錄為’’擴散菌落’’。

2.5.5.2. 擴散菌落形成鏈狀時，若僅一條則應視為一個菌落，若有兩條以上存在時，應視其鏈源處之不同，分別計數之。若為彼此分開而形成大菌落時，亦應予以計數。

2.5.6. 各稀釋倍數均無菌落生長者，則生菌數應小於1乘以最低稀釋倍數並註明估計值（附表：樣品編號6）。

2.5.7. 若二重複平板之菌落數，其中一片在25～250個之間，另一片大於250個時，兩者均應計數（附表：樣品編號7）。

2.5.8. 若二稀釋倍數之菌落數，各有一片在25～250個之間，另一片大於250個或小於25個時，四片皆計數，並依 2.5.2 .節公式計算之（附表：樣品編號8）。

2.5.9. 當二稀釋倍數之菌落數，其中1稀釋倍數之2重複平板之菌落數均在25～250之間，另1稀釋倍數之2重複平板之菌落數，一片在25～250之間，另一片大於250個或小於25個時，四片皆計數，並依公式計算之（附表：樣品編號9及10）。

2.5.10. 確證被污染者或依其他理由認為不適當者，應不得計算之。

附表　生菌數計算舉例說明（2平板／稀釋倍數）

2.6. 檢驗流程圖

2.7. 可參考使用經確效認可之市售培養基、生化檢測套組或鑑定系統，惟檢驗結果有爭議時，應以本檢驗方法為準。

2014.04.22 有關食品含菌數的相關法規

一般食品衛生標準( 102.08.20修正 )

生食用食品類衛生標準（96.12.21訂定，102.08.24修正）
生熟食混合即食食品類衛生標準 (102.08.20修正)

-------一般食品衛生標準---------

第 1 條本標準依食品衛生管理法第十七條規定訂定之。

第 2 條食品衛生，除法規另有規定外，應符合本標準。

第 3 條一般食品之性狀應具原有之良好風味及色澤，不得有腐敗、不良變色、異臭、異味、污染、發霉或含有異物、寄生蟲。

第 4 條一般食品之微生物限量如下：

第 5 條本標準自發布日施行。

-------生食用食品類衛生標準（96.12.21訂定，102.08.24修正）-------

第 1 條本標準依食品衛生管理法第十七條規定訂定之。

第 2 條生食用食品係指經清洗、去皮等調理過程處理後可立即供食之食品。

第 3 條生食用食品之性狀應具原有之良好風味及色澤，不得有腐敗、不良變色、異臭、異味污染、發霉或含有異物、寄生蟲。

第 4 條生食用食品之微生物限量如下：

第 5 條本標準自發布日施行。

-------生熟食混合即食食品類衛生標準 (102.08.20修正)-------

第 1 條本標準依食品衛生管理法第十七條規定訂定之。

第 2 條生熟食混合即食食品係指同時含有生熟食原料之即食性食品。

第 3 條生、熟食混合即食食品之性狀應具原有之良好風味及色澤，不得有腐敗、不良變色、異臭、異味、污染、發霉或含有異物、寄生蟲。

第 4 條生熟食混合即食食品之微生物限量如下：

第 5 條本標準自發布日施行。

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