筆記：B12

來源：台灣地區食品營養成分資料庫

B12

(16)維生素B12

維生素B12可謂目前發現最複雜的維生素，與鈷成複合物存在，故又稱鈷氰維生素(Cyanocobalamin)。由於其構造極為複雜，必須以微生物檢定法來定量。目前所用菌株為Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis ATCC 7830 (CCRC 11051)。(AOAC 1995k, Sec 952.20)

筆記：維生素B6

來源：台灣地區食品營養成分資料庫

論文參考 - 含白色蔬果之高脂飲食對ICR小鼠大腸黏膜基因表現的影響

來源：含白色蔬果之高脂飲食對ICR小鼠大腸黏膜基因表現的影響

摘要

大腸直腸癌盛行於已開發國家，近年來國內大腸直腸癌發生率逐年攀升，已成為國人發生人數最多的癌症。研究指出大腸直腸癌的發生與飲食型態有密切關係，目前主要的保健飲食建議為降低脂質及增加蔬果攝取量。蔬菜與水果富含多種膳食纖維、維生素、礦物質及植化素，大部分研究認為高蔬果飲食可降低罹患大腸直腸癌風險。考量國人近年飲食西化，脂質攝取量明顯增加，因此本研究以預防之觀點，透過微陣列分析於高脂飲食下個別探討攝食國人常食用之白色蔬果對小鼠大腸黏膜基因表現之影響，藉由基因表現差異評估對腸道保健之可能效益。實驗動物選用非近親交配品系雄性ICR小鼠，依照飼料組成分為六組：高脂組（HF）、高脂荔枝組（HFL）、高脂龍眼組（HFO）、高脂芭樂組（HFG）、高脂冬瓜組（HFW）及Chow diet組（Chow），高脂飼料提供脂質熱量百分比為30%，高脂蔬果組則於高脂飼料中添加10%蔬果乾粉。各組餵食四週後犧牲，採集大腸黏膜總RNA進行微陣列分析與執行Q-PCR加以驗證；採集血液與肝臟分析三酸甘油酯、膽固醇與維生素C濃度。高脂冬瓜組之體重增加與肝臟三酸甘油酯濃度低於高脂組與高脂水果組，然而高脂組與高脂蔬果組於攝食量無顯著差異。微陣列分析結果顯示，與低脂Chow組比較，高脂組小鼠大腸黏膜中於參與免疫反應、反應氧化壓力、細胞增生、細胞凋亡及脂質代謝相關等基因之表現量增加；與高脂組相比，高脂蔬果組小鼠大腸黏膜中於參與免疫反應、反應氧化壓力、細胞增生、細胞凋亡及脂質代謝相關等基因之表現量減少。Q-PCR驗證可見，高脂組大腸組織中發炎指標cyclooxygenase-2（COX-2）、細胞增生指標Ki-67基因表現量高於Chow組與高脂蔬果組。攝食高脂飲食會增加小鼠大腸環境中之免疫反應、細胞增生、細胞凋亡、脂質代謝與反應氧化壓力相關基因表現，顯示高脂飲食對大腸健康具較負面影響；於高脂飲食下攝取白色蔬果則與高脂飲食基因表現呈現相反結果，顯示攝取白色蔬果可改變高脂影響的趨勢，其中以冬瓜最具潛力。

2014.04.30 MRS培養基

配置MRS培養基

MRS(尚未加入Agar)

• 粉末配方：MRS, Agar

• 目標體積：2800 mL ( 700mL*4瓶)

配置 Gram's Stain 試劑 → Safranin（for gram staining）

Safranin（for gram staining）

• Safranin O （2.5% sol’n in 95% ethyl alcohol）----------------10.0 mL
• Distilled water ----------------------------------------------------------100.0mL

來源：Microbiological Applications （P329）
ISBN：0-697-13764-3

本次目標 1100  mL

材料

• Safranin O ----------------------- 2.5 g
• 95% 的酒精 -----------------------100mL
• Distilled water -------------------1000 mL
• 1000 mL 廣口血清瓶 ------------*1
• 攪拌石 ------------------------------*1
• 電磁加熱攪拌器--------------------*1
• 電子秤 ------------------------------*1
• 藥勺 ---------------------------------*1
• 100mL 小燒杯---------------------*1
• 1000 mL 定量筒 ------------------*1
• 500 mL 定量筒 --------------------*1
• 滴管架 ------------------------------*1
• 玻璃漏斗 ---------------------------*1
• 
  

方法

1. 先秤重 2.5 g 的 Safranin O ，再將100 mL 的酒精倒入廣口血清瓶，接著將秤好的 Safranin 倒入，此時得到Safranin O 的濃度為 2.5% 。>> Safranin O，95% 的酒精，500 mL 定量筒，藥勺，電子秤，100mL 小燒杯，漏斗，1000 mL 廣口血清瓶。
2. 將配製好的2.5% Safranin ，加入1000 mL 的Distilled water ，同時可以將攪拌石至入，放在電磁加熱攪拌器一邊加水一邊攪拌。 >> Distilled water，攪拌石，電磁加熱攪拌器，1000 mL 定量筒。
3. 最後，將小瓶放在滴管架，用玻璃漏斗輔助分裝，每瓶60~80 mL 。>> 玻璃漏斗，滴管架。

配置 Gram's Stain 試劑 → Gram’s Iodine

Gram's Iodine（Lugol’s）

• potassium iodide 2.0 gm in 300 mL of distilled water and then add 1.0 g  iodine crystals.

來源：Microbiological Applications （P330）
ISBN：0-697-13764-3

本次目標 900 mL

材料：

• potassium iodide 2.0 g*3 --------- 6.0 g
• iodine crystals 1.0 g *3 ----------- 3.0g
• distilled water 300 mL*3 --------- 900 mL
• 1000 mL 量桶 ------------------------*1
• 磁性攪拌棒 -----------------------------*1
• 900mL 廣口血清瓶 -------------------*1
• 藥勺 -------------------------------------*1
• 電子秤 ----------------------------------*1
• 電磁加熱攪拌器 -----------------------*1
• 100 mL 燒杯 --------------------------*1
• 玻璃漏斗 -------------------------------*1

※備註：過程中的所有容器與器材皆需用 distilled water 沖洗過。
 方法：

1. 先取純水 900 mL 。>>  1000 mL 量桶。
2. 先將燒杯放在電子秤歸零，秤重 potassium iodide 6.0 g，接著再按一次歸零，秤重 iodine crystals 3.0 g 。>> 電子秤、藥勺、100 mL 燒杯。
3. 將廣口血清瓶置放在電磁加熱攪拌器上，將剛秤重好的藥品，用玻璃漏斗輔助倒入廣口血清瓶，同時也可將磁性攪拌棒置入。>> 900 mL 廣口血清瓶、玻璃漏斗、電磁加熱攪拌器、磁性攪拌棒。
4. 接著，將 900 mL 純水倒入廣口血清瓶，同時可以用此純水，倒一些來沖洗燒杯、沖洗玻璃漏斗至廣口血清瓶內。
5. 最後，分裝在小瓶子內，每個小瓶子約 60 ~ 80 mL 如有剩餘，保存以備用。